Reaksi antara asam askorbat (vitamin C) dengan H2SO4 (asam sulfat) dan amonium molibdat (ammonium molibdate) digunakan dalam metode spektrofotometri UV-Vis untuk menentukan kadar vitamin C. Pada prinsipnya, asam askorbat akan bereaksi dengan H2SO4 untuk membentuk asam 2-sulfoglioksilat, yang kemudian akan bereaksi dengan amonium molibdat untuk membentuk senyawa yang disebut 2-sulfoglioksilammonium molibdat. Senyawa ini memiliki absorbansi yang kuat pada panjang gelombang tertentu, sehingga dapat diukur dengan spektrofotometer UV-Vis.

Untuk menentukan kadar vitamin C dengan metode ini, sampel diencerkan dengan larutan pembawa yang mengandung H2SO4 dan amonium molibdat. Kemudian, sampel tersebut diuji dengan spektrofotometer UV-Vis pada panjang gelombang yang sesuai. Biasanya, panjang gelombang yang dipilih adalah sekitar 525 nm. Absorbansi yang diukur akan meningkat seiring dengan meningkatnya konsentrasi vitamin C dalam sampel. Dengan menggunakan kurva kalibrasi yang telah dibuat sebelumnya, kadar vitamin C dapat dihitung dengan menggunakan rumus yang sesuai.

Metode ini cukup akurat dan sensitif, sehingga dapat digunakan untuk menentukan kadar vitamin C dalam berbagai sampel, seperti makanan, suplemen, dan produk kosmetik. Selain itu, metode ini juga relatif mudah dilakukan dan memerlukan peralatan yang tidak terlalu mahal, sehingga banyak digunakan dalam laboratorium analisis kualitatif dan kuantitatif.